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碧云天坐蓐的DNA损害检测试剂盒(γ-H2AX免疫荧光法)，英文名为DNA Damage Assay Kit by γ-H2AX Immunofluorescence，是通过免疫荧光染色检测DNA损害标识物γ-H2AX (即磷酸化的H2AX)的含量以证据DNA是否损害的检测试剂盒。本试剂盒中的γ-H2AX兔单抗不错识别东说念主、小鼠或大鼠的γ-H2AX，因此本试剂盒不错通过荧显豁微镜或高内涵筛选(High content screening， HCS)等检测东说念主、小鼠或大鼠等细胞或组织中的DNA损害。

本试剂盒提供了固定液、洗涤液、阻塞液、一抗、荧光标识二抗、细胞核荧光染色液、封片液，使用时无须再配制其它任何溶液。提供了细胞核荧光染色液，不错把细胞核染成蓝色荧光，这么不错知道地判断细胞核内DNA是否损害。使用本试剂盒检测BGC-823细胞核中DNA损害的成果参考图1。

图1. 碧云天DNA损害检测试剂盒(γ-H2AX免疫荧光法)检测BGC-823 (东说念主胃癌细胞)细胞核中DNA损害的成果图。平淡培养条目下的BGC-823中，γ-H2AX含量很低，细胞核内确实莫得绿色荧光染色(图B)；在100μM Cisplatin (S1552)引导6小时后，确实通盘细胞核内DNA均出现损害，γ-H2AX含量大大升高，细胞核内绿色荧显豁耀增强(图F)；在50μM Camptothecin (SC0141)和100μM Etoposide (SC0173)差异引导1.5小时和6小时后，部分细胞核内DNA出现损害，γ-H2AX含量彰着升高，细胞核内绿色荧显豁耀增强(图J、图N)。Cisplatin、Etoposide或Camptothecin不错向碧云天购买。内容染色成果会因现实条目、检测仪器等的不同而存在各异，图中成果仅供参考。

本试剂盒中提供的阻塞液为碧云天的QuickBlock™免疫染色阻塞液，仅10分钟支配即可完成阻塞。

使用本试剂盒染色后γ-H2AX呈绿色荧光，其最大激勉波长为495nm，最大辐射波长为519nm；细胞核呈蓝色荧光，其最大激勉波长为364nm，最大辐射波长为454nm。

凭据DNA损害的旨趣，DNA的损害检测试剂盒不错分为三类：基于损害DNA理化性质的转换检测DNA损害，如彗星现实；基于分子杂交检测DNA损害，如荧光原位杂交法(FISH)；以及基于DNA损害后酿成的产物检测DNA损害，如磷酸化的H2AX、通晓的3'-OH (TUNEL)和8-OHdG等。前两种智商是基于荧光标识平直不雅测DNA的损害情况，而基于DNA损害后酿成的产物检测DNA损害是通过标识物的检测波折反应DNA的损害进度[1-3]。本试剂盒是通过DNA损害后酿成的磷酸化的H2AX Ser139产物(即γ-H2AX或γH2AX)波折评估DNA的损害，也被称为DNA双链断裂染色检测试剂盒(DNA Double Strand Break (DSB) Staining Kit)、细胞双链DNA断裂检测试剂盒(Cellular DNA Double Strand Break Assay Kit)、或H2AX磷酸化检测试剂盒(H2AX Phosphorylation Assay Kit)。

常见的DNA损害有碱基修饰、DNA链内和链间交联、DNA单链断裂(DNA single strand-breaks， SSBs)以及DNA双链断裂(DNA double-strand breaks， DSBs)等，其中DNA双链断裂被以为是最严重的DNA损害。引起DNA产生双链断裂的物理或化学身分有紫外线映照、电离辐射(X、γ射线等)、遗传毒性化学物资和化疗药物等。DSBs的无效配置或障碍配置不错引发基因组衰竭，最终导致肿瘤偏执它有关疾病的发生[4]。

H2AX，全称为H2A histone family member X，也可简称为H2A.X，是染色体组卵白H2A的变异体之一。在细胞DNA双链发生断裂时，磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)有关激酶(Phosphatidylinositol 3-kinase-related kinases， PIKKs)家眷成员中的ATM (Ataxia-telangiectasia mutated protein)、ATR (ATM and RAD3-related)等使H2AX上的第139位丝氨酸发生磷酸化修饰，酿成磷酸化的H2AX，即γ-H2AX。H2AX磷酸化产生的γ-H2AX含量水平不错知道地反应出DNA的损害进度及配置情况，而被凡俗运用于DNA损害和细胞凋一火盘问中，成为一种遑急的DNA损害标识物。γ-H2AX常用于DNA损害的细胞或动物模子的检测，也凡俗运用于化合物的遗传毒性检测以及临床中肿瘤的早期筛查与调理成果的评价[5-6]。

本系列家具包括γ-H2AX兔单抗和小鼠单抗两类抗体，同期提供绿色和红色两种荧光二抗，以知足不同的染色需求，具体见有关家具。

如若检测96孔板内的样品，本试剂盒不错检测100-500个样品(抗体肖似使用0-4次)；如若用于检测6孔板内的样品，频繁不错检测25-50个样品(抗体肖似使用4-9次)；如若检测组织切片至少不错检测50个样品。

包装清单： 家具编号 家具称呼 包装 C2035S-1 固定液 50ml C2035S-2 洗涤液 500ml C2035S-3 免疫荧光染色阻塞液 50ml C2035S-4 γ-H2AX兔单抗 5ml C2035S-5 抗兔488 5ml C2035S-6 细胞核染色液(DAPI) 50ml C2035S-7 抗荧光淬灭封片液 10ml — 解析书 1份 保存条目：

固定液、细胞核染色液(DAPI) -20℃保存，其余试剂均4℃保存，半年灵验。其中抗兔488和细胞核染色液(DAPI)须避光保存。

珍爱事项：

固定液对东说念主体无益，操作时请极端留心，并珍爱灵验看护以幸免平直讲和东说念主体或吸入体内。

免疫荧光染色时，请珍爱回收使用过的γ-H2AX兔单抗和抗兔488。回收后频繁至少不错肖似使用5次，如若出现玷污、千里淀等非常款式，应住手使用。

◇广西陆续出台系列政策文件，推动传统产业现代化，持续深化体制机制改革推进行业稳产提质降本增效，创新利益联结机制保障蔗农增收，加快全产业链优化升级把糖业特色优势产业做强做大，牢牢端稳中国的“糖罐子”。

每次使用洗涤液洗涤时须尽量吸尽残余液体，同期要保执样品名义有些湿润，不颖异掉，临了一次洗涤完时吸尽洗涤液。

需使用不错不雅察绿色荧光和蓝色荧光的荧显豁微镜或高内涵分析仪。

同族具仅限于专科东说念主员的科学盘问用，不得用于临床会诊或调理，不得用于食物或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康中国电信电话卡有多少个，请穿现实服并戴一次性手套操作。

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